1 甘油液保存法
將已分純的待存菌接種于肉湯中，37℃培養(yǎng)18～24h，然后按5份肉湯溶液、2份甘油－生理鹽水保存液的比例分裝于滅菌的微量離心管或細(xì)胞凍存管中，貼上標(biāo)簽，置－80℃～－20℃冰箱保存。此法操作簡(jiǎn)便，不需要特殊設(shè)備，效果好，可以保存菌種3年左右，無(wú)變異現(xiàn)象，而且此方法還可以保存一些要求較高的特殊菌種，適用范圍廣。所以此方法適合實(shí)驗(yàn)室普通菌種或特殊菌種的較長(zhǎng)期的保存［4］。
2 濕牛奶凍存法
將待存菌種于各自生長(zhǎng)良好的平板培養(yǎng)基上，經(jīng)分純后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。用準(zhǔn)備好的保護(hù)劑牛奶洗下菌苔，再用無(wú)菌毛細(xì)滴管吸取菌懸液滴入菌種管球部，每管球部約有一半的菌液，之后火焰封口，貼上標(biāo)簽，保存于－20℃冰箱。此方法操作比較簡(jiǎn)便，不需特殊設(shè)備、不需要花費(fèi)很多時(shí)間，而且保存時(shí)間大約3年，時(shí)間較長(zhǎng)，不易變性，也不容易污染。所以此方法適合實(shí)驗(yàn)室菌種較長(zhǎng)時(shí)間的保存［3］。
3 蒸餾水保存法
取滅菌蒸餾水6～7ml加于已接待存菌斜面培養(yǎng)基的試管內(nèi)，用吸管研磨，洗下斜面上的菌苔，充分混勻，將此菌液分裝于滅菌的螺旋小瓶中，或用膠塞密封，貼上標(biāo)簽，置于4℃保存。此法制作簡(jiǎn)單，不需要特殊設(shè)備，且不需要經(jīng)常移種，而且可以保存數(shù)年，但要注意保存的時(shí)候需要直立放置。所以此方法適合實(shí)驗(yàn)室菌種的長(zhǎng)期保存［4］。
4冷凍真空干燥法
將待存菌分純后，用準(zhǔn)備好的保護(hù)劑牛奶洗下菌苔，把菌懸液滴入菌種管后，在管口抽取少許棉花塞入管內(nèi)*處，放入冰箱－40℃速凍40min，放入準(zhǔn)備好的混有鹽的冰中，接上真空泵，真空抽干呈粉末狀，火焰封口，貼上標(biāo)簽，保存于－40℃冰箱。此法保存時(shí)間長(zhǎng)，可達(dá)15年，不易變性，但需要儀器，一般實(shí)驗(yàn)室難以配備，而且過(guò)程復(fù)雜，操作難度大，需要較長(zhǎng)時(shí)間才能完成。所以此方法適合具有條件的實(shí)驗(yàn)室菌種的長(zhǎng)期保存［3］。
6小結(jié)
綜上所述，我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)過(guò)程中或者短期保存菌種時(shí)，可以選擇斜面低溫保存法、半固體瓊脂法、液體石蠟保存法、高層半固體瓊脂石蠟保存法、紙片法，進(jìn)行保存；如果需要較長(zhǎng)時(shí)間的保存菌株，可以選擇甘油液保存法、濕牛奶凍存法、蒸餾水保存法、冷凍真空干燥法保存菌株，其中冷凍真空干燥法需要實(shí)驗(yàn)室配備好相應(yīng)的儀器設(shè)備。如果一些菌株?duì)I養(yǎng)要求比較高的話，可以選擇甘油液保存法、冷凍真空干燥法保存。當(dāng)然上述菌株保存的方法不是、zui方便的保存法，還需要我們不斷的探索，不斷的研究，找到一種或幾種簡(jiǎn)單、方便、時(shí)間長(zhǎng)的保存方法。
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